企業新聞

      ELISA 的注意事項點擊次數:2242 更新時間:2015-07-09

                            ELISA 的注意事項

      (一)加樣

      在 ELISA 中除了包被外,一般需進行 4-5 次加樣。在定性測定中有時不強調加樣量的準確性,例如規定為加樣一滴。此時應該使用相同口徑的滴管,保持準確的加樣姿勢,使每滴液體的體積基本相同。在定 量測定中則加樣量應力求準確。標本和結合物的稀釋液應按規定配制。加樣時應將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現氣泡。

      (二)保溫

      在 ELISA 中一般有二次抗原抗體反應,即加標本后和加結合物后,此時反應的溫度和時間應按規定的要求,保溫容器是水浴箱,可使溫度迅速平衡。各 ELISA 板不應疊在一起。為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕紗布的濕盒中。濕盒應該是金屬的,傳熱容易。如用保溫箱,空濕盒應預先放在其中,以平衡 溫度,這在室溫較低時更為重要。加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。如室溫高于 20℃,ELISA 板可避光放在實驗臺上,以便不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。

      (三)洗滌

      洗滌在 ELISA 過程中不是反應聚,但卻是決定實驗成敗的關鍵。洗滌的目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物 質。聚苯乙烯待塑料對蛋白質的吸附作用是普遍性的。因此在 ELISA 測定的反應過程中應盡量避免非特異性吸附,而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。在標本和結合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯(吐 溫,Tween)一類物質即右達到此目的。聚山梨酯是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯,為非離子型的表面張力物質,常作為助溶劑。根據脂肪酸的種類而對聚山梨 酯編號,結合月桂酸的為聚山梨酯 20,在 ELISA 中zui為常用。它的洗滌效果好,并具有減少非特異性吸附和增強抗原抗體結合的作用。

      洗滌如不*,特別在zui后一次,如有酶結合物的非特異性吸附,將使空白值升高。另外,在間接法中如血清標本內的非特異性 IgG 吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標抗體作用而產生干擾。

      ELISA 板的洗滌一般可采用以下方法:

      ①吸干孔內反應液;

      ②將洗滌液注滿板孔;

      ③放置 2 min,略作搖動;

      ④吸干孔內液,也可傾去液體后在吸水紙上拍干。洗滌的次數一般為 3~4 次,有時甚至需洗 5~6 次。

      電話:
      13788993509
      13788995069
      021-64133189
      傳真:
      021-64129208
      陳小姐點擊這里給我發消息
      徐小姐點擊這里給我發消息
      朱小姐點擊這里給我發消息
       
      安全聯盟站長平臺

      化工儀器網

      推薦收藏該企業網站
      主站蜘蛛池模板: 精品第一国产综合精品蜜芽| 99精品全国免费观看视频| 欧美浓毛大泬视频| 四虎影视www| 天堂在线最新资源| 好男人好资源在线影视官网| 久久精品无码一区二区三区不卡| 热久久最新视频| 国产91乱剧情全集| 日本激情一区二区三区| 天天综合天天干| 久久亚洲精品国产亚洲老地址| 欧美精品在欧美一区二区| 啦啦啦中文在线观看日本| 欧美jizzjizz在线播放| 天堂va在线高清一区| 久久久久777777人人人视频| 欧美交换乱理伦片120秒| 免费a级在线观看播放| 蜜柚直播在线第一页| 国产精品一区二区欧美视频| eva樱花动漫网| 教师mm的s肉全文阅读| 云上的日子在线| 欧美色图在线播放| 免费在线视频a| 色一情一乱一伦一区二区三区 | 亚洲av极品无码专区在线观看 | 国产美女一级高清免费观看| 一区二区三区免费视频观看| 日本久久久久久久中文字幕| 亚洲www在线观看| 欧美视频免费在线播放| 免费能直接在线观看黄的视频免费欧洲毛片**老妇女 | 欧美日韩综合视频| 免费看欧美成人性色生活片| 色综合天天综合| 国产成人免费a在线视频app | 俄罗斯激情女同互慰在线| 色偷偷亚洲第一综合网| 国产对白在线观看|