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      腫瘤標志物分類、檢測原理和檢測方法點擊次數:4138 更新時間:2010-08-11

                                  腫瘤標志物分類、檢測原理和檢測方法
       

      根據WHO資料,范圍內惡性腫瘤是人類僅次于心腦血管病的第二大死亡原因,占總死亡人數的22%,并逐年增加。

      10種常見腫瘤:胃癌、肝癌、食管癌、結直腸肛門癌、白血病、子宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。腫瘤的早期發現、早期診斷、早期治療是患者獲得長期生存的zui主要途徑。以肝癌為例,腫瘤直徑<2cm,5年生存率幾乎100%;直徑每增加 1cm,5年生存率下降20%。腫瘤診斷三大支柱是圖像診斷(包括B超、CT、核磁共振)、化學診斷(血清學和免疫學)及細胞學和組織學診斷,而后兩者均以腫瘤標志為主要或輔助觀察指標。


      當前,腫瘤標志物的檢測已從細胞水平深入到分子基因水平,在檢測技術上,它將生物化學、核醫學、免疫學、細胞學、病理學、分子生物學等諸多學科融合在一起,不僅使檢測的項目有了大幅度的增加,而且檢測的特異性和靈敏度也有很大的提高。腫瘤標志物在腫瘤診斷,檢測腫瘤復發與轉移,判斷療效和預后以及人群普查等方面都有較大的實用價值,而且在腫瘤發生和發展機理研究中也具有重要作用。腫瘤標志物除用于腫瘤診斷外,可為臨床腫瘤治療提供依據及以其為靶,進行腫瘤的靶向治療及免疫治療。腫瘤標志學已成為腫瘤學中一個重要的新學科、新領域。
      腫瘤標志物分類

      目前腫瘤標志物尚無統一的分類和命名,臨床常用的腫瘤標志物大多是根據其生物化學和免疫學特性可分為:

      (1)腫瘤抗原
      腫瘤胚胎性抗原:甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)。
      白血病系列分化抗原:CD系列。
      腫瘤增殖抗原:增殖細胞核抗原/周期素(PCNA/Cyclin)、DNA多聚酶(DNA-pol)、Ki-67核抗原、Ki-S1核抗原。

      (2)糖類抗原 CA19-9、CA125、CA50、CA724、CA15-3、CA242、SCC。

      (3)酶和同工酶 乳酸脫氫酶(LDH)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)、前列腺酸性磷酸酶(PSA)、胃蛋白酶原I、II(PG I、II)。

      (4)激素和異位激素 雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、絨毛膜促性腺激素(β-HCG)、促腎上腺皮質激素(ACTH)、降鈣素。

      (5)蛋白類 角蛋白(Keratin上皮來源腫瘤):角蛋白19片段(Cyfra21-1)、組織多肽抗原(TPA)、組織多肽特異性抗原(TPS)、膀胱癌抗原(UBC)。核基質蛋白22(NMP22) 、DR70(是一種環形結構大分子蛋白質)。β2-微球蛋白。本周氏蛋白。

      (6)腫瘤相關病毒 EBV與鼻咽癌有關,HPV與宮頸癌有關,HBV與肝癌有關,T細胞白血病-淋巴瘤病毒(HTLV-1)與成人白血病有關等。

      (7)癌基因、抑癌基因及其產物 由于一些腫瘤中都有癌基因、抑癌基因及其產物異常表達,因而是較佳的廣譜腫瘤分子標志。

      1
      )癌基因與相關腫瘤
      ras家族(P21)乳腺癌、結腸癌、胃癌、肝癌、腎癌、膀胱癌、肺癌、白血病等
      C-erbB2(HER-2/ neu)乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胃癌等
      C-myc 肺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、睪丸癌等
      C-met 肝癌、胃腸癌、甲狀腺癌、腎癌、腦瘤等
      mdm-2 軟組織肉瘤
      bcr-abl融合基因 慢性髓細胞性白血病(CML)
      Ph1 t(9,22)易位 白血病
      EGF 對腫瘤有促進生長作用
      EGFR 乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、食管癌、肝癌等
      TGF-a 乳腺癌、肝癌等

      2
      抗癌基因與相關腫瘤
      Rb 視網膜母細胞瘤、骨肉瘤、乳腺癌、小細胞肺癌等
      P53 肺癌、消化道癌、乳腺癌、骨肉瘤、淋巴瘤、白血病等
      APC 家族性結腸腺瘤病、大腸癌、胃癌、肺癌等
      FAP 家族性結腸腺瘤病、大腸癌
      DCC 大腸癌、胃癌
      NF1 神經纖維瘤、嗜鉻細胞瘤、神經母細胞瘤
      WT1 Wilms腎瘤
      MTS1(P16基因)肺癌、食管癌、肝癌、大腸癌、白血病等
      FHIT 食管癌、胃癌、結腸癌、肺癌、肝癌、頭頸癌、乳腺癌、胰腺癌等

      3
      )轉移相關基因
      nm23 轉移抑制基因,與腫瘤轉移和預后呈負相關。
      CD44 表達增加,促進轉移。
      組織蛋白酶D(chth-D) 在癌浸潤和轉移中起著關鍵作用

      4
      )凋亡相關基因
      bcl-2 抑制細胞凋亡。可作為抗癌藥物敏感性及預后指標。
      Fas 屬于TNF家族,該基因轉染腫瘤細胞后促進細胞凋亡。

      5
      )多藥耐藥性(MDR)基因
      P-糖蛋白(P-gp)
      多藥耐藥相關蛋白(MRP)
      肺耐藥蛋白(LRP)
      谷胱甘肽轉移酶(GST-π)

      腫瘤標志物檢測方法

      同一個標志物可用不同方法進行檢測,如可以從血清學水平、免疫組化檢測CEA或P-gp等,也可以用FCM或RT-PCR來檢測。

      血清學水平:除傳統的放射免疫分析(RIA)和酶聯免疫分析(ELISA)外,目前在國內主要有三類全自動免疫化學分析系統(化學發光免疫分析系統;熒光免疫分析系統和電化學發光免疫分析系統)廣泛的應用于臨床,對血清腫瘤標記物檢測具有快速、準確、半定量。可檢測AFP、CEA、CA19-9、 CA72-4、CA125、CA15-3、NSE、Cyfra21-1、PSA、f- PSA等。

      組織學水平:免疫組化和原位分子雜交組化技術是近年發展起來的一門新興邊緣學科。它將免疫學技術和分子生物學技術同組織病理學制片方法巧妙結合在一起,在組織細胞原位顯示某些化學成分和特定基因片段。常規標本中約5%~15%疑難病例或惡性腫瘤需采用免疫組化進行鑒別診斷和預后分析。Porter D利用mRNA原位雜交檢測細胞水平基因表達,在組織芯片上免疫組織化學檢測乳房導管原位癌和浸潤癌病理學特征和臨床意義。圖像分析技術可以定量測定組織切片上腫瘤細胞DNA含量和形態學分析,對判斷腫瘤惡性度及預后具有重要臨床價值。

      細胞學水平:流式細胞術(Flow Cytometry, FCM)。是利用FCM對細胞和細胞器的結構和某些功能進行定量檢測,并利用細胞表面特異性標志對特定細胞亞群進行分析和分選的先進技術方法。檢測白血病和淋巴瘤標記物(CD系列)利于診斷和鑒別診斷;用FCM檢測惡性腫瘤細胞的P-gp可為臨床選擇化療藥物提供依據;我們用FCM檢測消化道腫瘤外周血 CD44水平。

      電鏡:電鏡酶細胞化學技術、免疫電鏡技術、原位雜交電鏡技術。

      分子學水平:聚合酶鏈反應法(PCR)是一種極為簡單、敏感、、特異和快速的能在體外進行擴增DNA的技術。
       
      生物芯片分析系統:①基因芯片。我們做了卵巢癌和食管癌]基因表達譜的研究工作。Zhu G報道用顯微切割和芯片技術結合分析乳房癌不同部位腫瘤細胞之間基因表達差異。②組織芯片。組織芯片可以幫助節省試劑、人力和費用。過去分析一個腫瘤的試劑量現在可以分析高達數百個甚至1000個腫瘤,而且是在同一張切片上同時進行。③蛋白芯片。為多標志聯合檢測提供了理想的工具,英國RANDOX公司已經在同時推出的包含8種腫瘤標志的蛋白芯片。
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