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      標記的鏈霉卵白素-生物素法點擊次數:2629 更新時間:2011-03-10

                                        標記的鏈霉卵白素-生物素法

      www.yingshitiantang.com標記的鏈霉卵白素-生物素法(LSAB)          

      標記的鏈霉卵白素-生物素法(LSAB法)是標記的卵白素技術,20世紀80年代開始采用。
      基本試劑:
      ① *抗體
      ② 生物素化第二抗體;
      ③ 辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素。
      實驗方法:
      1. 將固定后的標本用PBS漂洗;
      2. 于室溫下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用來密封內源性過氧化物酶
      3. TBS漂洗3次,每次1min;
      4. 在室溫下用二抗的正常血清孵育20min;
      5. 滴加一抗后在室溫下放置1h或4℃冰箱內過夜;
      6. TBS漂洗3次,每次1min;
      7. 滴加二抗后于室溫放置30min;
      8. 將標本于生物素化的第二抗體在室溫孵育10min;
      9. TBS沖洗3次,每次1min;
      10. 再與稀釋的LSAB在室溫孵育10min;
      11. 重復步驟9;
      12. 用DAB或AEC顯色;
      13. 用蒸餾水反復沖洗;
      14. 用蘇木精復染;
      15. 封片;

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